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層析柜是一種高分離率、高靈敏度和高選擇性的分離方法
更新時(shí)間:2024-02-02 點(diǎn)擊次數(shù):4692
  層析柜是一種用于分離和純化樣品的設(shè)備,它采用了層析技術(shù),這是一種具有高分離率、高靈敏度和高選擇性的分離方法。
 
  使用原理:
 
  生物分子間存在很多特異性的相互作用,它們之間都能夠?qū)R欢赡娴慕Y(jié)合,這種結(jié)合力就稱(chēng)為親和力。親和層析就是通過(guò)將具有親和力的兩個(gè)分子中一個(gè)固定在不溶性基質(zhì)上,利用分子間親和力的特異性和可逆性,對(duì)另一個(gè)分子進(jìn)行分離純化。被固定在基質(zhì)上的分子稱(chēng)為配體,配體和基質(zhì)是共價(jià)結(jié)合的,構(gòu)成親和層析的固定相,稱(chēng)為親和吸附劑。親和層析時(shí)首先選擇與待分離的生物大分子有親和力物質(zhì)作為配體,并將配體共價(jià)結(jié)合在適當(dāng)?shù)牟蝗苄曰|(zhì)上。將制備的親和吸附劑裝柱平衡,當(dāng)樣品溶液通過(guò)親和層析柱的時(shí)候,待分離的生物分子就與配體發(fā)生特異性的結(jié)合,從而留在固定相上;而其它雜質(zhì)不能與配體結(jié)合,仍在流動(dòng)相中,并隨洗脫液流出,這樣層析柱中就只有待分離的生物分子。通過(guò)適當(dāng)?shù)南疵撘簩⑵鋸呐潴w上洗脫下來(lái),就得到了純化的待分離物質(zhì)。
 
  設(shè)備結(jié)構(gòu):
 
  層析柜通常由以下幾個(gè)部分組成:外殼、工作區(qū)域、控制系統(tǒng)等。外殼通常由金屬或耐酸堿塑料制成,主要目的是保護(hù)工作區(qū)域,防止外界污染,并提供便于清洗和消毒的表面。工作區(qū)域通常由內(nèi)襯不銹鋼的工作面板、前玻璃門(mén)、風(fēng)道系統(tǒng)和高效過(guò)濾器組成,風(fēng)道系統(tǒng)和高效過(guò)濾器可過(guò)濾空氣,并將潔凈空氣輸送至工作區(qū)域,防止外部雜質(zhì)進(jìn)入??刂葡到y(tǒng)則由電子和機(jī)械部件組成,包括紫外線(xiàn)照射器、通風(fēng)機(jī)和風(fēng)量計(jì)等,可保證工作區(qū)域的負(fù)壓狀態(tài),確保污染物向?qū)游龉裢獠颗欧拧?br /> 
  操作步驟:
 
  層析柜的使用操作包括以下幾個(gè)步驟:樣品的準(zhǔn)備和處理、層析柱的安裝和平衡、上樣和洗脫、收集和檢測(cè)。在操作過(guò)程中,需要注意避免樣品污染和交叉污染,同時(shí)要控制好流速和溫度等參數(shù),保證分離效果和實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
 
  注意事項(xiàng):
 
  層析柜在使用過(guò)程中需要注意以下幾點(diǎn):首先,要嚴(yán)格按照操作規(guī)程進(jìn)行操作,避免人為失誤導(dǎo)致的實(shí)驗(yàn)失?。黄浯?,要保持設(shè)備的清潔和衛(wèi)生,避免樣品污染和交叉污染;第三,要定期對(duì)設(shè)備進(jìn)行維護(hù)和保養(yǎng),保證其正常運(yùn)轉(zhuǎn)和使用壽命;最后,要注意安全問(wèn)題,如避免超壓運(yùn)行、避免使用未經(jīng)批準(zhǔn)的化學(xué)品等。

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